德国NanoTemper蛋白质稳定性分析技术（nanoDSF）：PR.48

☆  高通量：可同时测定48个样品
☆ 超高数据分辨率：每个样品采集超过1000个数据点
☆ 功能多样：Tm、Ton、Tagg、Cm、△G、等温稳定性、变复性等
☆ 检测浓度范围广：5 µg/ml 到250 mg/ml
☆ 样品消耗量低：10 µL/样品
☆ 检测不受限制：无需染料，可在任何类型缓冲液中测定
☆ 运行成本低：耗材价格低、无维护费、非常简单易操作

Prometheus NT.Plex主要参数：

1. 具有多个检测模块：双紫外(Dual-UV, 330/350nm)检测模块和背向反射光（Backreflection optics）检测模块；
2. 直接检测蛋白质内源荧光，测定时无需添加染料，不受缓冲液条件限制；
3. 测定参数：T_m、T_on、C_m、ΔG、T_agg；
4. 可用于研究蛋白质等温稳定性和变温稳定性；
5. 可测定蛋白样品中变性成分的比例，用于质量控制；
6. 检测通量：每次24个样品；
7. 样品体积：10 μL/样品；
8. 样品浓度范围：5 μg/mL - 250 mg/mL;
9. 上样方式：机械臂自动上样；
10. 温控范围：15-110℃，升温速度：0.1-7℃/分钟；
11. 数据采样率：每个样品每分钟≥20个数据点；
12. 仪器无需定期更换配件，实验完成后无需对仪器进行清洗维护

检测原理：

nanoDSF是一种先进的差示扫描荧光技术，具有超高分辨率，利用蛋白中色氨酸和酪氨酸自发荧光检测其稳定性。它广泛应用于抗体工程、膜蛋白研究、制剂和质量控制等领域。蛋白中色氨酸和酪氨酸荧光受其所在微环境的影响很大，尤其是色氨酸荧光，蛋白结构的变化通常会影响其强度和发射波长。Prometheus 仪器配备的荧光检测器可测定样品在两种波长（350 nm 和 330 nm）下的荧光强度，因而可以灵敏的检测到蛋白去折叠过程中荧光强度和荧光峰值的变化。通过变性曲线可以得到蛋白稳定性的重要参数。衡量目标蛋白的热稳定性可通过参数熔融温度（Tm），即一半蛋白去折叠时的温度。